EGFP基因在粉纹夜蛾细胞中的高效表达

High Expression of EGFP Gene in The Cells of Cabbage Looper,Trichoplusia ni

摘要: 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)基因是从一种水母体内分离的新型报告基因(report gene) (Chalfie等，1994)，其编码的、由238个氨基酸组成的GFP是一种对光稳定的可溶性蛋白，在长波紫外光或蓝光激发下就能发出绿色荧光，而不需添加任何酶或底物，因而检测十分方便快速，无背景干扰。同时GFP也是目前唯一能在异源细胞内表达后自发产生荧光的蛋白质EGFP基因是由野生型GFP基因经人工改造后更适合于在真核细胞中表达的突变体，基因编码区长717 bp，编码产物增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)含239个氨基酸残基(Cormack等，1996)。EGFP最大激发波长由原来GFP的390 nm增加到480 nm左右，其最大发射波长50 nm的发光强度比野生型GFP增加了近20-35倍。这样不仅有利于荧光显微镜观测或流式细胞仪检测，且在自然光下也可见到绿色荧光，更便于检测。