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Molecular cloning of tubulin beta 3 (TUBB3) in Gekko japonicus and preparation of its polyclonal antibody

LI Jing QIN Yong GU Yun LIU Yan LIU Mei

LI Jing, QIN Yong, GU Yun, LIU Yan, LIU Mei. Molecular cloning of tubulin beta 3 (TUBB3) in Gekko japonicus and preparation of its polyclonal antibody. Zoological Research, 2012, 33(4): 395-401. doi: 10.3724/SP.J.1141.2012.04395
Citation: LI Jing, QIN Yong, GU Yun, LIU Yan, LIU Mei. Molecular cloning of tubulin beta 3 (TUBB3) in Gekko japonicus and preparation of its polyclonal antibody. Zoological Research, 2012, 33(4): 395-401. doi: 10.3724/SP.J.1141.2012.04395

多疣壁虎tubulin beta 3基因克隆和多克隆抗体制备

doi: 10.3724/SP.J.1141.2012.04395
基金项目: 国家自然科学基金 (31071874, 31171007 ); 江苏高校优势学科建设工程资助项目 (PAPD); 江苏省高校自然科学研究重大项目 (09KJA180005, 11KJA180004); 南通大学自然科学基金前期预研项目资助
详细信息
    作者简介:

    李 静:李静 (1983-), 女, 硕士, 研究方向为细胞和分子神经生物学

    通讯作者:

    刘梅, 博士, 教授, 硕士生导师, Tel:0513-85051852刘炎, 博士, 教授, 硕士生导师, Tel:0513-85051852

  • 中图分类号: Q959.62; Q349; Q786; Q511

Molecular cloning of tubulin beta 3 (TUBB3) in Gekko japonicus and preparation of its polyclonal antibody

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    Author Bio:

    LI Jing

    Corresponding author: LIU Yan,LIU Mei
  • 摘要: Tubulin beta 3 (TUBB3) 是特异表达于神经元的微管蛋白tubulin beta家族成员, 被认为在维持轴突正常状态起着重要作用, 是神经元特异的标志蛋白。该研究旨在获得多疣壁虎TUBB3全长cDNA序列并制备其多克隆抗体, 为进一步研究多疣壁虎断尾再生提供基因和抗体工具。根据多疣壁虎中枢神经组织cDNA文库中TUBB3的EST片段序列, 采用RACE-PCR方法, 获得了全长cDNA, 序列全长1 790 bp, 编码450个氨基酸, 与其他物种TUBB3蛋白高度同源; RT-PCR方法 和Northern blotting检测了TUBB3组织表达谱及其转录本的大小; 在GenBank登录号为JQ080315; NJ法构建的系统进化树分析表明,多疣壁虎的TUBB3蛋白与鸡的TUBB3蛋白在进化距离上较近; 构建pET-32a-TUBB3原核表达载体, 诱导表达并纯化TUBB3蛋白, 获得兔抗壁虎TUBB3多克隆抗体, ELISA检测其效价大于1:65 536, Western blotting方法证实所制备的多克隆抗体可特异识别多疣壁虎神经组织的的TUBB3蛋白。
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出版历程
  • 收稿日期:  2012-02-01
  • 修回日期:  2012-05-15
  • 刊出日期:  2012-08-10

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