一种简捷有效的组蛋白提取法
A Simple,Efficient Procedure For Isolating Histone
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摘要: 从组织细胞中提取组蛋白的方法主要有3类:(1)酸抽提,(2)高离子强度解离,(3)精蛋白替代。其中以酸抽提法最为常用。但该方法的传统操作包括分离纯化细胞核、染色质等步骤,在此过程中易造成所要提取蛋白的降解,因而保持低温和使用蛋白酶抑制剂成为必需。但抑制剂有时会带来不良影响,并对有些生物如一些低等生物其效果又不甚理想。另外,此传统操作所获的组蛋白往往混有一些酸溶性的非组蛋白成分。从细胞化学的研究中,已知经甲醇固定的细胞仍可用稀盐酸抽出其核内组蛋白。基于此我们建立了一种先固定、后酸抽提组蛋白的提取方法。此方法不仅克服了上述不足,而且更为简捷有效,适用范围更广。现以小牛胸腺为材料,通过与其它方法的比较阐述其优点。