文昌鱼核糖核蛋白体结构与功能的研究Ⅰ.文昌鱼Trna和5SRNA的制备
Studies on the Structure and Function of Amphioxus Ribosomes Ⅰ.Isolation of Amphioxus tRNAs and 5S RNAs
-
摘要: 本文报导了从厦门白氏文昌鱼(Branchiostoma belcheri Gray)中制备Trna和5S RNA的方法。将文昌鱼洗净，用搅碎机破碎，然后用苯酚法提取小分子RNA。RNA粗制品经DEAE-纤维素DE22、DEAE-Sephadex A-50和Sephadex G-100柱层析分离纯化，分别得到Trna和5S RMA。再用12%聚丙烯酰胺疑胶电泳进一步纯化。测定了Trna接受甘氨酸、丙氨酸和酷氨酸的活力分别为6.3%、5.2%和21%—25%。Trna的主要生物功能是携带与转移氨基酸参与蛋白质生物合成，并对基因表达进行调节控制。5S RNA是核糖核蛋白体的一个组分，在蛋白质生物合成中具有重要的功能，也是研究生物进化比较理想的一种生物大分子。自Hoagland等（1957）发现Trna及Tissieres等（1959）发现核糖核蛋白体RNA后，科学工作者例广泛地开展了对Trna和5S RNA结构与功能的研究。文昌鱼是一种处于脊椎动物与无脊椎动物之间过渡类型的脊索动物，属脊索动物门的头索亚门，最接近脊椎动物亚门。因此对它进行深入的生化研究，在探索生物进化方面有较大的学术意义。本文报告从文昌鱼中制备Trna和5S RNA以及tRNA接受氨基酸活力的初步结果。Abstract: This article reports the method for preparing Trna and 5S RNA from amphioxus (Branchiostoma belcheri Gray).Whole tissues of frozen amphioxus were homogenized in buffer Ⅰ with a Waring blendor at 0 ℃ for 30s,then the lowmolecular-weight RNAs were extracted by the phenol method.By means of column chromatography of DEAE-celloluse,DEAE-Sephadex A-50 and Sephadex G-100,tRNAs and 5S RNAs were obtained separately.They were further purified by electrophoresis on polyacrylamide gel.The accepting activity of amphioxus tRNA was determined:glycine,6.3%,alanine,5.2% and tyrosine,21%-25%.
下载: